의약품 연구 | ambiokorea

연구개발(R&D)

의약품 연구(Pharmaceutical Research)

퇴행성관절염치료제

기술 개요

퇴행성 관절염은 관절 연골의 미란, 연골하 골의 재형성, 골극 형성, 그리고 활액막의 염증 반응을 초래하는 퇴행성 관절 질환으로, 역학적 (mechanical) 및 생화학적 (biochemical) 요소 모두가 중요한 역할을 하는 것으로 생각되고 있다. 퇴행성 관절염 치료제의 현황 및 개발 흐름을 보면 현재 시판되고 있는 퇴행성 관절염 치료제는 플루피프로펜과 같은 NSAID 약물이 기본성분이며 이는 염증생성에 관여하는 효소의 합성을 억제하는 작용과 강한 소염진통 효과를 나타내며 근본적인 치료가 아닌 통증 완화를 목표로 한다. 현재 퇴행성 관절염 치료제의 개발은 두가지의 큰 흐름에서 진행중이며 연골파괴를 억제하고 연골생성을 촉진히시는 약제를 개발하는 것이 첫 번째 흐름이고, 두 번째는 연골을 생성하는 연골세포의 사망이 퇴행성 관절염의 중요 병인으로 대두됨에 따라 연골세포사망유도인자를 밝혀내고 이의 억제제를 찾는 것이다.

기술 내용

1. 연골파괴억제 및 생성 촉진인자

퇴행성 관절염 연골 세포에서 제 I 형 콜라겐의 발현과 제 II 형 콜라겐의 발현을 검색한다.

1) MMP-1과 MMP-3의 발현

2) MMP와 길항 작용을을 하는 TIMP의 발현.

3)IL-1β에 의한 MMP-1과 MMP-3 의 발현 유도.

2. 연골세포사망유도인자 저해제

연골세포의 사망은 퇴행성 관절염환자의 관절염이 진행되는 부위에서 정상인보다

세포사망이 훨씬 증가되다는 보고들이 발표되면서 퇴행성 관절염의 중요 병인중 하나이다.

하지만 Fas ligand나 nitric oxide정도 외에는 구체적으로 알려진 세포 사망유발인자가 없으며 Fas ligand나 nitric oxide는 거의 대부분의 세포에서 세포사망을 유도하기 때문에 퇴행성 관절염의 유발인자로 보기가 어렵다.

1) 정상 세포 및 여러 가지 종류의 cell line에는 세포사망을 유도하지 않지만 연골세포에서만

특이적으로 세포사망을 유발하는 유발인자 발굴.

2) 세포사망중에서도 아포토우시스를 유발함을 TUNEL staining, FACS analysis를 통하여 확인

3) 저해제를 처리한 연골세포군의 세포사망검색

기관지천식 치료제

기술 개요

1.1. 기관지천식

기관지천식은 만성 알레르기성 염증성 질환으로, 이 때 일어나는 기도의 염증 반응은 CD4+ T-세포의 조절을 받으며 원인 알레르겐에 노출 시에 Th2 면역 반응은 항진되고 Th1 면역 반응은 억제되며 호산구의 침윤을 특징으로 하는 기도의 만성 염증이 일어난다. 우리나라 기관지천식의 유병률이 소아에서 1981년 5.6%, 1990년 10.1%, 1997년에는 15%로 증가하고 있다.

1.2. IL-4 특이 억제제로서 기관지 천식 치료 후보약물

마우스 기관지 천식 알레르기 모델에서 항원특이적인 IgE의 생성을 억제하고, 알레르기성 염증반응의 발생에 중요한 사이토카인인 IL-4의 발현을 억제함으로써 기관지천식 치료제 신약 후보물질로 개발하고 있다.

기술 특징

2.1. 항기관지 천식치료제로서 작용기전

본 연구를 통해 개발된 물질은 분자생물학적으로 전사 인자인 c-maf의 작용을 억제하여, 완전히 분화된 Th2 cell에 작용하여 IL-4의 생성을 억제시키는 작용기전을 가진다. 그리고, Transgenic mouse와 기관지 천식 동물모델을 이용한 효능평가를 통해 IgE 와 IgG1 생산을 억제하여, IL-4 생산을 억제하는 저해제로서 작용하여 Airway hyperresponsiveness을 억제하고, BAL eosinophil와 IgG2a 생산에 영향을 주지않음으로서 기관지 천식은 물론 알러지 질환에 대한 예방 및 치료제로서 확인하였다.

기존 기술과 차별성

3.1. 기존 약물 및 치료

기관지천식의 치료방법으로 원인 알레르겐에 대한 회피 요법과 스테로이드제( 부신스테로이드, 지속형 베타 자극제, 로이코트리엔 길항약등) 를 중심으로한 약물요법이 있다. 최근 기관지천식의 병인기전에 대한 이해와 이에 따른 강력한 항염증제제의 사용에도 불구하고, 기관지천식에 의한 사망률과 중증도는 큰 변화가 없다.

3.2. 기술의 독창성 및 신규성

기존의 기관지천식 치료제는 기관지 확장제와 항염증제에 국한되어 있다. 그러나 NV를 이용한 치료제 개발은 전반적인 생체 면역에는 영향을 주지 않으면서 알레르기 반응만을 억제하므로 보다 근원적인 기관지 천식치료제로서의 가능성을 가지고 있다.

항원/항체 제작

■ 항원/항체
		유전자 재조합을 이용한 단백질 합성, 항체 제작과 정제의 full service 제공.

1. 항원 제작
1)		PCR cloning - 단백질을 얻고자 하는 유전자에 대한 정보와 그 DNA 또는 RNA를 보내주시면 신속하고 정확하게 클로닝하여 드립니다. - 특이한 유전자일 경우 그 조직이나 cell을 보내주시면 됩니다. - 만약 DNA가 없다면 저희가 보유한 cDNA library를 사용한 클로닝도 가능합니다.
		· 특징 - 서열 분석 과정을 통한 정확한 클로닝 - Fusion이나 Tag이 있는 형태로도 클로닝 가능 - Plasmid 유전자를 mini-prep이나 maxi-prep으로 분리해 공급 가능 - 단백질 발현을 원하시면 발현율이 매우 높은 expression vector로 옮겨 분리 정제해 드림
		· 기간 - 10 ~14일 (약 2주) - RNA나 fusion 형태일 경우, 시간 더 소요

2)		단백질의 발현 및 정제 · 발현 형태 - Fusion protein: His-tag & GST tag - SOD fusion protein 가능 (solubility 증대 효과) - Soluble protein expression & Inclusion body isolation
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		· 정제 - Affinity chromatography를 통한 빠르고 정확한 분리 정제 - 95% 이상의 순도를 지닌 ug~ mg 단위의 단백질 공급 가능
		· 특징 - 여러 가지 tag을 사용한 fusion 단백질 형태로 발현되므로 항체를 사용한 검출 용이함 - SOD fusion 형태로의 발현이 가능하여 solubility를 높일 수 있음 - 고순도의 inclusion body 정제 - 로지타 균주를 사용한 human protein에 가까운 단백질 발현 - 분리 정제한 단백질에 대한 항체 제작, 복수 정제까지 full service 제공